近日，药物质量与安全预警教育部重点实验室（中国药科大学）钟文英教授团队在权威期刊Advanced Functional Materials发表了最新研究成果“Triple Enzyme-Regulated Molecular Hydrogels for Carrier-Free Delivery of Lonidamine”。钟文英教授和徐克明副研究员为本文的共同通讯作者，课题组2018级博士生吴灿为本文第一作者，中国药科大学为本文唯一通讯单位。论文链接：https://doi.org/10.1002/adfm.202104418。

肿瘤微环境中存在多种高表达的生物酶，这些酶对肿瘤的发生、发展和转移至关重要。由于广泛存在于癌细胞的多个细胞器，它们往往无法被小分子药物精准靶向。近年来，利用生物酶来调控超分子自组装，构建水凝胶载药体系，是肿瘤诊疗的新策略之一。其中，酶促自组装（Enzyme-Instructed Self-Assembly）可利用癌细胞高表达的碱性磷酸酶或其他蛋白酶，触发多肽小分子自组装形成纳米纤维，进而选择性杀死癌细胞。由于自组装多肽分子具有良好的靶向性和生物相容性，这类超分子水凝胶在肿瘤诊疗上备受关注。

鉴于此，该团队设计了一种具有三酶响应性的自组装多肽分子LND-1p-ES，用于药物氯尼达明（Lonidamine，简称LND）的无载体递送。LND-1p-ES主要组成部分有：（i）LND作为头基，既可增强多肽的自组装能力，又能在胞内蛋白酶作用下缓慢释放纯药；（ii）Gly-Phe-Phe-Tyr序列，用于增强多肽序列的自组装能力；（iii）磷酸化酪氨酸部分，作为碱性磷酸酶（ALP）的底物；（iv）琥珀酸单酯部分，作为酯酶（CES）的底物。由于ALP位于细胞膜和细胞质，而CES主要位于细胞质，因此癌细胞高表达的ALP和CES可对LND-1p-ES的胞内自组装进行时空调控。细胞膜表面的ALP首先催化LND-1p-ES转化为LND-1-ES，触发初级自组装。之后，LND-1p-ES/LND-1-ES进入细胞质，在胞内ALP和CES共同作用下转化为凝胶因子LND-1-OH。后者在细胞内形成致密的纳米纤维网络，不仅能干扰肌动蛋白的组装、提高癌细胞的ROS水平，还可作为药物储库，在胞内蛋白酶的作用下缓慢释放LND，通过破坏线粒体功能诱导癌细胞死亡。

该研究的主要创新点：设计的LND-1p- ES分子集药物与载体于一体，并利用三酶时空调控其自组装过程，将LND前药选择性递送至癌细胞。与LND纯药、单酶响应性或无响应性对照水凝胶相比，LND-1p-ES水凝胶治疗组的体内外抗癌效果显著。此外，LND-1p-ES水凝胶在注射部位刺激性小，对小鼠主要器官的形貌无明显影响，表现出具有良好的生物相容性。该研究利用癌细胞高表达的多种生物酶来增强氯尼达明的抗癌效果，为多肽纳米材料的构建和药物递送提供了一种通用策略。未来，可利用病灶部位存在的其他信号分子，调控多肽-药物偶联分子的自组装行为，在疾病靶向的功能性软材料的开发上具有良好的应用前景。

该研究工作获得国家自然科学基金面上项目（编号：51973234，21775165），江苏省基础研究计划面上项目（编号：BK20191326）和中国药科大学双一流学科高原项目（编号：CPU2018GY25）等资助。

转载自：中国药科大学科技处